Linc00152/微小RNA-150/β-连环蛋白轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响

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    摘要 摘要目的探讨Linc00152/微小RNA(miR)-150/β-连环蛋白(β-catenin)轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。方法人非小细胞肺癌细胞A549随机分为Linc00152 KD组和长链非编码RNA(lncRNA)对照组,分别采用Linc00152短发卡RNA(shRNA)和lncRNA对照慢病毒感染,建立Linc00152敲降细胞系。采用噻唑蓝(MTT)、克隆形成实验、划痕实验和蛋白质印迹法(Western blot)分析Linc00152对细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析Linc00152和miR-150关系及其靶基因。采用Western blot分析靶基因蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果lncRNA对照组细胞Linc00152表达水平(1.24±0.22)明显高于Linc00152 KD组Linc00152表达水平(0.42±0.12),差异有统计学意义(t=4,819,P<0.05)。lncRNA对照组细胞吸光值(2.11±0.18)明显高于Linc00152 KD组(1.75±0.12),差异有统计学意义(t=4,819,P<0.05)。lncRNA对照组细胞迁移数量[(152.65±10.43)个]明显高于Linc00152 KD组[(97.47±9.43)个],差异有统计学意义(t=5.081,P<0.05)。lncRNA对照组细胞上皮标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平(1.23±0.11)明显低于Linc00152 KD组细胞(2.54±0.33),差异有统计学意义(t=4.909,P<0.05)。lncRNA对照组细胞间质标志蛋白波形蛋白(Vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平(1.02±0.09、1.03±0.11)明显高于Linc00152 KD组细胞(0.26±0.07、0.34±0.09),差异有统计学意义(t=4.127、3.298,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示Linc00152的靶miRNA是miR-150,而miR-150的靶基因是β-catenin。lncRNA对照组细胞miR-150表达水平(1.08±0.15)明显低于Linc00152 KD组miR-150表达水平(2.87±0.18),差异有统计学意义(t=3.179,P<0.05)。lncRNA对照组细胞β-catenin蛋白表达水平(1.24±0.22)明显高于Linc00152 KD组β-catenin蛋白表达水平(0.42±0.12),差异有统计学意义(t=4.819,P<0.05)。结论Linc00152在非小细胞肺癌中表达上调,下调Linc00152可显著抑制非小细胞肺癌的增殖、迁移和上皮-间充质转化,其作用机制可能是Linc00152通过吸附miR-150促进β-catenin表达。
    出处 《中华实验外科杂志》 2021年11期
    出版日期 2021年11月07日(中国Betway体育网页登陆平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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