摘要
摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-98-5p靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响并探讨其作用机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GES-1、BGC-823、SGC-7901、MGC-803细胞(购自中国科学院上海细胞库和ATCC细胞库)中miR-98-5p的mRNA表达水平；构建绿色荧光蛋白(GFP)-NC和GFP-miR-98-5p慢病毒稳定细胞株，采用生物信息学和双荧光素酶报告基因验证miR-98-5p和HMGA2的靶向关系；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中HMGA2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达；采用Transwell检测细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验，计数资料采用率(%)表示，组间比较采用χ2检验。结果与GES-1细胞(1.94±0.16)比较，BGC-823(0.41±0.03)、SGC-7901(0.53±0.05)、MGC-803(0.50±0.04)细胞中miR-98-5p的mRNA相对表达水平下降，差异有统计学意义(t＝7.437、6.288、6.305，P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示，与GFP-NC细胞比较(1.77±0.12)，转染HMGA2-WT后GFP-miR-98-5p细胞(0.42±0.05)的相对荧光素酶活性下调(t＝6.701，P<0.05)，差异有统计学意义。Western blot结果显示，GFP-NC、GFP-miR-98-5p、GFP-miR-98-5p＋pcDNA和GFP-miR-98-5p＋HMGA2细胞中HMGA2的表达水平分别为2.15±0.17、0.44±0.05、0.46±0.04、2.30±0.19；Vimentin的表达水平分别为1.85±0.13、0.47±0.04、0.45±0.05、1.39±0.09；E-cadherin的表达水平分别为0.36±0.03、1.60±0.11、1.65±0.10、0.72±0.05。与GFP-NC细胞比较，miR-98-5p过表达细胞中HMGA2和Vimentin的表达下降，E-cadherin的表达增加(t＝8.032、7.981、8.692，P<0.05)，差异有统计学意义；Transwell结果显示，与GFP-NC细胞[(88.17±9.16)个]比较，GFP-miR-98-5p细胞[(33.34±5.53)个]的侵袭个数下降(t＝4.231，P<0.05)，差异有统计学意义；与GFP-miR-98-5p细胞[(34.66±5.39)个]比较，GFP-miR-98-5p＋HMGA2细胞[(62.51±7.03)个]的侵袭个数上调(t＝3.858，P<0.05)，差异有统计学意义。结论miR-98-5p在胃癌细胞中低表达，miR-98-5p过表达可通过靶向HMGA2抑制胃癌细胞的EMT，从而抑制肿瘤的侵袭和转移。
机构地区
南阳市中心医院普外科 473000,南阳市中心医院神经内科三病区 473000,南阳市中心医院心血管内科特需病区 473000,河南省人民医院胃肠外科，郑州 450000
出版日期
2020年08月10日（中国Betway体育网页登陆平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
