简介:摘要目的探讨沙库巴曲缬沙坦对心力衰竭(心衰)大鼠左心室重构和心功能的影响及其机制。方法SPF级雄性Wistar大鼠46只,体重300~350 g,于动物实验室适应性饲养7 d。然后,分为4组,即心衰组(n=12,腹腔注射盐酸阿霉素2.5 mg/kg,每周1次,连续6周,建立心衰模型)、心衰+沙库巴曲缬沙坦组(治疗组,n=12,阿霉素给药方法同心衰组,在首次注射阿霉素前1周开始给予沙库巴曲缬沙坦治疗,按照60 mg·kg-1·d-1剂量灌胃,持续7周)、心衰+沙库巴曲缬沙坦+F13A组[F13A组,n=12,阿霉素及沙库巴曲缬沙坦用药方法同治疗组,在给予沙库巴曲缬沙坦同时,腹腔注射100 μg·kg-1·d-1 血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白(APJ)拮抗剂F13A,持续7周]及对照组(n=10,用相同容量的生理盐水代替阿霉素,给药方法同心衰组)。末次注射阿霉素1周后,采用超声心动图检测大鼠心脏结构及功能。超声检测完成后处死大鼠,留取血液及左心室标本。HE染色观察大鼠左心室心肌组织形态,Masson染色观察大鼠左心室心肌纤维化情况,TUNEL染色法检测大鼠左心室心肌细胞凋亡情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qRCR)检测大鼠左心室心肌Apelin和APJ的mRNA表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血浆Apelin-12浓度,Western blot法检测大鼠左心室心肌Apelin和APJ的蛋白表达水平。结果干预完成后心衰组、治疗组、F13A组和对照组大鼠分别存活7、10、8和10只,进入下一步实验。超声心动图结果示,与对照组比较,心衰组大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)均较高(P均<0.05),而左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)均较低(P均<0.05)。与心衰组比较,治疗组大鼠LVEDD和LVESD均较低(P均<0.05),而LVEF和LVFS均较高(P均<0.05)。与治疗组比较,F13A组大鼠LVESD较高(P<0.05),LVEF和LVFS较低(P均<0.05)。HE染色结果示,对照组大鼠心肌细胞排列整齐、结构致密,心衰组大鼠心肌细胞排列紊乱、扭曲且细胞间隙增加,治疗组大鼠心肌细胞排列稍整齐、致密,F13A组则与心衰组类似。Masson染色结果示,对照组大鼠左心室心肌间质仅有少量胶原纤维,而心衰组胶原纤维较多,胶原容积分数(CVF)大于对照组(P<0.05)。与心衰组比较,治疗组大鼠左心室心肌纤维化程度较轻,CVF较小(P<0.05),而F13A组大鼠的CVF则大于治疗组(P<0.05)。TUNEL检测结果示,与对照组比较,心衰组大鼠心肌细胞凋亡指数较高(P<0.05)。与心衰组比较,治疗组大鼠心肌细胞凋亡指数较低(P<0.05)。与治疗组比较,F13A组大鼠心肌细胞凋亡指数较高(P<0.05)。RT-qPCR和Western blot法检测结果示,与对照组比较,心衰组大鼠左心室心肌组织中Apelin和APJ的mRNA和蛋白水平均较低(P均<0.05);与心衰组比较,治疗组大鼠左心室心肌组织中Apelin和APJ的mRNA和蛋白水平均较高(P均<0.05);与治疗组比较,F13A组大鼠左心室心肌组织中APJ mRNA和蛋白以及Apelin蛋白水平均较低(P均<0.05)。ELISA检测结果示,与对照组比较,心衰组大鼠血浆Apelin浓度较低(P<0.05);与心衰组比较,治疗组大鼠血浆Apelin浓度较高(P<0.05);与治疗组比较,F13A组大鼠血浆Apelin浓度较低(P<0.05)。结论沙库巴曲缬沙坦可部分逆转心衰大鼠左心室重构、改善心功能,而这一作用与Apelin/APJ通路上调有关。