摘要
本研究旨在构建多发性骨髓瘤黏蛋白1（两串联）基因（rnuc1-2vntr）的真核表达载体及该重组体在COS-7细胞中的表达，为研制多发性骨髓瘤基因疫苗奠定基础。以MUC1—2VNTR蛋白的编码基因作为目的基因，在其前端加上KOZAK序列后，两端分别加上HindⅢ和XbaⅠ酶的酶切位点，将人工合成的全基因定向插入pcDNA3．1／myc—hisB载体中，转化E-coli感受态细胞获得重组菌株，经酶切及测序鉴定为pcDNA3．1-2vntr／myc—hisB重组质粒后，采用Lipofectimine脂质体介导法转染COS-7细胞，用荧光显微镜对荧光表达进行观察，然后用Westernblot检测重纽体在细胞内外的表达。结果表明：合成的MUC1-2VNTR基因全长约140bp，所构建的pcDNA3．1-2vntr／myc—hisB重组质粒经双酶切及测序鉴定后，与预期片段大小相符，并含有完整的阅读框架和目的基因。将其转入COS-7细胞后48小时，荧光显微镜和Westernblot检测均可证实黏蛋白1表达。结论：成功的构建了多发性骨髓瘤真核表达载体pcDNA3．1—2vntr／myc—hisB，并在COS-7细胞中成功地表达黏蛋白1，这为黏蛋白1的功能研究和多发性骨髓瘤基因疫苗的研制提供了实验基础。
出版日期
2009年04月14日（中国Betway体育网页登陆平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
