摘要
摘要目的探讨叶酸对糖尿病小鼠视网膜的保护作用及其抗氧化和抗炎机制。方法采用随机数字表法将32只16周龄SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组和叶酸组，另选择16周龄SPF级雄性C57BL/KsJ小鼠16只作为对照，叶酸组小鼠用(2 ml)叶酸灌胃每日1次，剂量为71 μg/kg，连续60 d；对照组和模型组小鼠以相同的方法给予相同体积的生理盐水，定期观察并记录各组小鼠运动、精神状态、体质量、空腹血糖(FPG)水平变化。灌胃结束后摘取小鼠眼球并分离视网膜；采用苏木精－伊红染色法评估各组小鼠视网膜组织病理学变化；收集小鼠球后血标本，采用ELISA法测定小鼠血清中同型半胱氨酸(Hcy)水平；采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视网膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA水平；采用Western blot法检测小鼠视网膜中B淋巴细胞瘤2蛋白(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、3-硝基酪氨酸(3-NT)和4-羟基壬氨酸(4-HNE)水平变化；采用生化试剂盒检测小鼠视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)活性、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和丙二醛(MDA)含量；采用免疫荧光染色法测定视网膜中NADPH氧化酶4(NOX4)含量。结果实验期间对照组小鼠FPG正常，体质量缓慢平稳增加；模型组小鼠FPG>16.7 mmol/L，体质量快速增加，叶酸组小鼠FPG逐渐下降，体质量增加较模型组平缓。实验后2个月，模型组小鼠血清Hcy浓度为(27.18±3.18)μmol/L，高于对照组的(8.28±2.18)μmol/L和叶酸组的(13.73±2.54)μmol/L，差异均有统计学意义(均P<0.05)；对照组小鼠视网膜结构完整，模型组小鼠视网膜厚度变薄，毛细血管生成增加，可见炎症细胞浸润，叶酸组小鼠视网膜厚度较模型组增加，新生血管和炎症细胞减少。模型组视网膜中TNF-α和IL-6 mRNA相对表达量均高于对照组，叶酸组视网膜组织中TNF-α mRNA、IL-6 mRNA相对表达量低于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。叶酸组小鼠视网膜中bax、3-NT和4-HNE蛋白相对表达量均高于对照组，但低于模型组，bcl-2蛋白相对表达量均低于对照组而高于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；叶酸组小鼠视网膜中T-SOD活性高于对照组而低于模型组，视网膜中8-OHdG质量浓度和MDA含量均低于对照组而高于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；叶酸组小鼠视网膜组织中NOX4蛋白表达明显弱于模型组。结论叶酸对糖尿病小鼠视网膜组织具有保护作用，其作用机制与降低血清Hcy水平、抑制视网膜组织中氧化应激反应细胞凋亡有关。
出版日期
2020年08月10日（中国Betway体育网页登陆平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
