摘要
从水生植物凤眼莲叶片中提取总RNA,经RT-PCR扩增出Ca2+-ATPase基因片段,经限制性内切酶(SmaI,NotI)酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了Ca2+-ATPase基因融合表达载体,.转化菌经IPTG诱导表达,获得了大小约48kD的可溶性目的蛋白,与预期相吻合.利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B(Gluta-thioneSepharose4B)亲和介质对重组蛋白进行纯化,获得了高纯度的目的蛋白.
出版日期
2014年06月16日(中国Betway体育网页登陆平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)